PCR elemzés: mi ez? Hogyan kell a PCR tesztet helyesen alkalmazni?

Nem is olyan régen, megbízható,egy nagyon érzékeny és gyors módszer egy személy különböző fertőző betegségeinek diagnosztizálására. Ezt a módszert PCR-analízisnek nevezzük. Mi az, mi lesz annak lényege, milyen mikroorganizmusok tudnak felfedni és hogyan kell megfelelően átadni, megmondjuk cikkünkben.

A felfedezés története

Kitalálták a polimeráz láncreakció (PCR) módszerét,Cary Myullis amerikai tudós 1983-ban. Kezdetben szabadalmaztatta a diagnózis módszerét a "Cetus Corporation" cégnél, amelyben az alkotója dolgozott. De 1992-ben minden jogot és szabadalmat eladtak a "Hoffman-La Roche" társaságnak. Ezt követően úgy tűnt, hogy párhuzamosan hasonló vizsgálatokat végeztek és más amerikai biológusok, köztük Alice Chen, David Edgar, John Treel készítettek. 1980-ban a szovjet tudósok, A. Slyusarenko, A. Kaledin és S. Gorodetsky foglalkoztak ezzel a problémával. Ezért lehetetlen meghatározni az egyedüli jogosultságot. Számos kiemelkedő biokémikus hozzájárult a polimeráz láncreakciós módszer kifejlesztéséhez és szabadalmaztatta az innovációkat. Jelenleg a PCR elemzést mindenhol speciálisan felszerelt laboratóriumokban végzik.

A PCR diagnosztikai eljárás lényege

PCR elemzés: mi és hogyan működik? A módszer lényege, hogy egy specifikus mikrobiális tápközegben mesterséges körülmények között a DNS-polimeráz speciális enzimje révén növekszik. Ehhez szaporítsd a létező DNS-anyagot. Így a patogén mikroorganizmus jelenlétében a mintában biokémiai laboratóriumi manipulációkkal nő a mennyisége, és a baktérium mikroszkóppal könnyen detektálható.

PCR elemzés - mi ez?

Hogyan történik az anyagi kutatás?

Az elemzés előírja:

  • A DNS-templát;
  • alapanyagok, amelyek az anyagdarab végeit összekötik;
  • egy termikusan stabil DNS polimeráz enzim;
  • az enzimek megfelelő működését biztosító vegyi anyagok;
  • pufferoldat szükséges ahhoz, hogy megfelelő feltételeket teremtsen a DNS-anyag növekedéséhez és fejlődéséhez.

    PCR-analízis 12

A PCR elvégzéséhez 25-30 ismétlést hajtunk végre, amely három szakaszból áll: denaturálás, hevítés és nyúlás.

A polimeráz láncreakció elemzésehasználjon speciális eszközt - erősítőt. A modern berendezések lehetővé teszik a csövek fűtésére és hűtésére szolgáló szükséges programot, hogy kiküszöbölhessék a hibákat a diagnózis során.

Hol használják a diagnózist?

A polimeráz-láncreakció módszerét az orvostudomány különböző területein alkalmazzák:

  • A törvényszéki tudósok a genetikai anyag, például a haj, a nyál vagy a vér azonosítására használják;
  • A PCR vérvizsgálat segít a genotipizálásban, például egy adott géntechnológiával módosított reakció egy adott gyógyszerre való felderítésében;
  • egy ilyen módszer segítségével megteremti az emberek közötti családi kapcsolatot;
  • a legelterjedtebb PCR módszer az orvosi diagnosztikába került a különböző fertőző betegségek meghatározása céljából.

Milyen fertőzések mutatják ki a PCR-t?

Tehát az orvostudomány hosszú és sikeresen alkalmazta a PCR elemzését. Mi ez, már megtanultuk. És milyen kórokozókat lehet észlelni vele? A következő fertőző betegségeket PCR diagnosztizálja:

  • hepatitisz A, B, C;
  • ureaplasmosis;
  • candidiasis;
  • chlamydia;
  • mycoplasmosis;
  • bakteriális hüvelygyulladás;
  • fertőző mononucleosis;
  • trichomoniasis;
  • papillomavírus fertőzés;
  • tuberkulózis;
  • az 1. és 2. típusú herpesz fertőzés;
  • Helicobacter pylori fertőzés;
  • citomegalovírus;
  • diftéria;
  • szalmonellózistól
  • HIV-fertőzés.

    PCR analízis HIV-re

A rák diagnózisában PCR-módszereket is alkalmaznak.

módszer előnyeit

Diagnózis A PCR számos előnnyel jár:

  1. Nagy érzékenység. Még a mikroorganizmus néhány DNS-molekulájával is, a PCR-analízis meghatározza a fertőzés jelenlétét. A módszer segít a krónikus és látens betegségekben. Gyakran előfordul, hogy a mikroorganizmust más módon nem művelik.
  2. A vizsgálat során bármilyen anyag, például nyál, vér, nem, haj, hámsejtek alkalmasak. A leggyakoribb a vérvizsgálat és az urogenitális kenet a PCR-en.

    PCR: a tesztet

  3. Nem igényel hosszú távú növénytermesztést. Az automatizált diagnosztikai folyamat lehetővé teszi, hogy 4-5 óra múlva megkapja a vizsgálat eredményeit.
  4. Az eljárás majdnem 100% -osan megbízható. Csak a hamis negatív eredmények egyszeri eseteit jegyezték fel.
  5. Többféle típus azonosításakórokozókat egyetlen anyagmintából. Ez nem csak felgyorsítja a betegség diagnosztizálási folyamatát, hanem jelentősen csökkenti az anyagi költségeket is. Gyakran az orvos átfogó PCR elemzést ír elő. A vizsgálat ára, amely a hat kórokozó definíciójából áll, körülbelül 1500 rubel.

Ajánlások az elemzésre való felkészüléshez

Ahhoz, hogy az eredmények megbízhatóak legyenek a PCR-vizsgálatban, az elemzést a diagnózis előkészítésére vonatkozó ajánlások alapján kell elvégezni:

  1. A nyál felszabadítása előtt tartózkodniuk kell az élelem és a gyógyszer bevétele előtt 4 órával az anyag bevétele előtt. Közvetlenül az eljárás előtt öblítse le a száját felforralt vízzel.
  2. A fenti szabályokat akkor kell követni, amikor egy minta az arc arcfelülete felől kerül. Az öblítés után ajánlatos egy könnyű bőrmasszázs elvégzése a mirigykiválasztás elkülönítéséhez.
  3. A vizeletet általában otthonról szüretelik.Ehhez alaposan meg kell végezni a nemi szervek WC-jét. 50-60 ml vizet kell összegyűjteni egy steril műanyag tartályban. Az anyag tisztaságának biztosítása érdekében javasoljuk, hogy a nők tampont helyezzenek be a hüvelybe, és a férfiak maximálisan kihúzzák a bőrt. Nem nyithatja meg az anyagot a menstruációs áramlás során.
  4. A spermiumhoz nem kell szexuálisan tartózkodniaTörölje a gyűjtést megelőző 3 napig. Továbbá az orvosok azt tanácsolják, hogy megtagadják a szaunát, a forró fürdőt, alkoholt és fűszeres ételeket. 3 órával a vizsgálat előtt meg kell tartózkodnia a vizeléstől.
  5. Urogenitális kenet szállítására, például haa klamidia PCR-re vonatkozó elemzést végeznek, mind a nők, mind a férfiak 3 napig ajánlják a szexuális pihenést. A vizsgálat előtt 2 héttel antibakteriális gyógyszereket nem szabad alkalmazni. Egy hétig meg kell hagynod intim zselék, kenőcsök, hüvelykúpok, fecskendõk használatát. 3 órával a vizsgálat előtt meg kell tartózkodnia a vizeléstől. A menstruáció során az anyaggyűjtést nem végzik el, csak a vértelesítés megszűnése után 3 nap elteltével urogenitális kenet kaphat.

PCR a terhesség alatt

A várakozás ideje alatt a baba sok fertőzőA nemi úton terjedő betegségek rendkívül veszélyesek a magzat normális fejlődéséhez. Az STD-k intrauterin növekedési retardációt, vetélést vagy koraszülést okozhatnak, a gyermek veleszületett rendellenességei. Ezért rendkívül fontos korai PCR-teszt elvégzése. 12 héttel jelentkezéskor be kell nyújtani az elemzést.

Analízis a Chlamydia PCR-ről

A kerítés anyaga a nyaki csatornából származikegy speciális ecsettel. Az eljárás fájdalommentes és nem jelent veszélyt a baba számára. Általában a terhesség ideje alatt a klamidit a PCR módszerrel, valamint az ureaplazmózis, a mycoplasmosis, a citomegalovírus, a herpesz és a papillomavírus segítségével vizsgálják. A vizsgálatok ilyen összetettje PCR-6.

PCR a HIV diagnózishoz

A polimeráz láncreakció módszerével kapcsolatbana reakció nagyon érzékeny a test változásaira és a diagnózis feltételeire, sok tényező befolyásolhatja az eredményt. Ezért a HIV-fertőzés PCR-elemzése nem megbízható módszer, hatékonysága 96-98%. Az esetek fennmaradó 2-4% -ában a teszt hamis pozitív eredményt ad.

De bizonyos esetekben a HIV-PCR-diagnosztika nélkülnem kezelni. Általában olyan személyek számára adják be, akik hamis negatív ELISA eredményt kapnak. Ezek a mutatók azt mutatják, hogy az illető még nem fejlesztett ki ellenanyagot a vírus ellen, és nem lehet kimutatni a szám többszörös növelése nélkül. Ezt úgy érhetjük el, hogy PCR módszerrel vérvizsgálatot végzünk.

Ez a diagnózis szükséges az élet első évének gyermekei számára is, akik HIV-pozitív anyától származnak. A módszer az egyetlen módja a gyermek állapotának megbízható meghatározására.

PCR a hepatitis diagnózisára

A polimeráz láncreakciós módszer lehetővé teszia hepatitis A, B, C vírus DNS-ét a fertőzés elleni antitestek kialakulása előtt vagy a betegség tüneteinek megjelenése előtt. Különösen hatékony a PCR-analízis a hepatitis C, mivel 85% az ilyen betegség tünetmentes, és anélkül, hogy kellő időben történő kezelés krónikussá válik.

PCR vérvizsgálat

A kórokozó időben történő felismerése segít elkerülni a szövődményeket és a hosszan tartó kezelést.

Átfogó PCR-felmérés

Komplex PCR elemzés: mi ez?Ez a vizsgálati módszer polimezarnoy láncreakció, amely során meghatározzuk egyidejűleg több faj fertőzés: Mycoplasma genitalium, Mycoplasma hominis, Gardnerella vaginalis, Candida, Trichomonas, citomegalovírus, Ureaplasma urealitikum, herpesz 1. és 2. típusú, gonorrhoea papillomavírus. Az ár a diagnózis tól 2000 3500 rubel. függően a klinikán, anyagok és berendezések, valamint a fajta elemzést: kvalitatív vagy kvantitatív. Mi szükséges az Ön esetében - az orvos dönt. Bizonyos esetekben, ha csak egyszerűen jelenlétének kimutatására a kórokozó más, például a HIV, a fontos szerepet, amelyet mennyiségi meghatározásához. a továbbiakban: „PCR-elemzése 12” a diagnózis minden a fenti kórokozók vizsgálata.

Az elemzési eredmények magyarázata

A PCR-analízis dekódolása nem nehéz.A mutatónak csak két skálája van - "pozitív eredmény" és "negatív eredmény". Ha kórokozót észlelnek, az orvosok 99% -os bizalommal igazolhatják a betegség jelenlétét, és folytathatják a beteg kezelését. A megfelelő oszlopban a fertőzés meghatározására szolgáló kvantitatív módszerben fel kell tüntetni a detektált baktériumok számértékét. Csak egy orvos tudja meghatározni a betegség mértékét és előírja a szükséges kezelést.

A PCR-analízis átvitelének helye?

Bizonyos esetekben, például meghatározásakorHIV-fertőzést a PCR módszerrel, negatív eredménnyel, további vizsgálatokra van szükség az eredmények megerősítésére.

Hol lehet az elemzés?

Ahol a PCR-elemzés benyújtása:az állami poliklinikában vagy egy magánlaboratóriumban? Sajnos az önkormányzati egészségügyi intézményekben a berendezések és a módszerek gyakran elavultak. Ezért jobb, ha előnyben részesítjük a korszerű berendezésekkel és magasan képzett személyzettel rendelkező magánlaboratóriumokat. Ezenkívül egy magán klinikán sokkal gyorsabb eredményeket érhet el.

Moszkvában számos magán laboratórium kínálPCR analízis végrehajtása különböző fertőzéseken. Például olyan klinikákban, mint a Vita, a komplex klinika, a Happy Family és az Uro-Pro, PCR elemzést végeznek. A vizsgálat ára 200 rubel. egy kórokozó meghatározására.

Megállapítható, hogy a fertőző betegség diagnózisaA PCR a legtöbb esetben gyors és megbízható módszer a kórokozó felismerésére a szervezetben a fertőzés korai szakaszában. Bizonyos esetekben azonban érdemes más diagnosztikai módszereket választani. Az ilyen tanulmányok elvégzésének szükségességét csak szakember határozhatja meg. A PCR analízis dekódolása szintén szakmai megközelítést igényel. Kövesse az orvos ajánlásait, és ne adja meg magának a teszteket, amelyek nem szükségesek.

tetszett:
1
Neichiporenko vizeletvizsgálata. Hogyan szereljük össze
A vizelet általános elemzése. Hogyan kell megtenni és mi a norma?
Hogyan vizsgálható a fekális okkult vér?
Hol lehet elemezni a kullancsot? Mi a teendő, mikor
Mennyire helyesen adja át az ürülék elemzését és szükségességét
Hogyan adható a vér a hormonoknak megfelelően?
A HIV-vírus vérvizsgálata megtehető
Hogyan kell helyesen beadni a vizeletvizsgálatot?
Mit fog mutatni a vizeletelemzés (dekódolás)
Legjobb hozzászólások
fel